健康

凝集试验

颗粒性抗原与抗体结合后的试验

  • 别名:试管凝集试验
  • 用途:抗血清效价测定
  • 凝集试验介绍
    颗粒性抗原与相应抗体结合后发生凝集的血清学试验。抗原与抗体复合物在电解质作用下,经过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块。试验可在玻板上进行,称为玻板凝集试验,可用于细菌的鉴定和抗体的定性检测;亦可在试管中进行,称试管凝集试验,主要用于抗血清效价测定。

    原理

    凝集试验颗粒状抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体直接结合所出现的凝集现象。分为玻片法和试管法。玻片法是一种定性试验方法。可用已知抗体来检测未知抗原。若鉴定新分离的菌种时,可取已知抗体滴加在玻片上,将待检菌液一滴与其混匀。数分种后,如出现肉眼可见的凝集现象,为阳性反应。该法简便快速,除鉴定菌种外,尚可用于菌种分型、测定人类红细胞的ABO血型等。试管法是一种定量试验的经典方法。可用已知抗原来检测受检血清中有无某抗体及抗体的含量。用来协助临床诊断或供流行病学调查研究。操作时,将待检血清用生理盐水连续成倍稀释,然后加入等量抗原,最高稀释度仍有凝集现象者,为血清的效价,也称滴度,以表示血清中抗体的相对含量。

    特性

    微量抗原与微量抗体结合后,就足以出现肉眼可见的反应。

    实现

    间接反应

    将可溶性抗原(或抗体)先吸附于一种与免疫无关的、一定大小的颗粒状载体的表面,然后与相应抗体(或抗原)作用。在有电介质存在的适宜条件下,即可发生凝集,称为间接凝集反应。用做载体的微球可用天然的微粒性物质,如人(O型)和动物(绵羊、家兔等)的红细胞、活性炭颗粒或硅酸铝颗粒等;也可用人工合成或天然高分子材料制成,如聚苯乙烯胶乳微球等。由于载体颗粒增大了可溶性抗原的反应面积,当颗粒上的抗原与微量抗体结合后,就足以出现肉眼可见的反应,敏感性比直接凝集反应高得多。

    直接反应

    细菌或细胞等颗粒性抗原与相应抗体直接反应,出现的凝集现象。主要有玻片法和试管法。玻片法是抗原和相应抗体在玻片上进行的凝集反应,用于定性检测抗原,如ABO血型鉴定、细菌鉴定等。试管法是在试管中倍比稀释待检血清,加入已知颗粒性抗原进行的凝集反应,用于定量检测抗体,如诊断伤寒病的肥达试验。试管法凝集反应时,抗原抗体结合出现明显可见反应的最大的抗血清或抗原制剂稀释度称为效价,又称滴度。

    应用

    诊断伤寒、副伤寒病的肥达氏反应(Widaltest)、布氏病的瑞特氏反应(Wrighttest)均属定量凝集反应。

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