IgG抗体（IgG抗体）-趣爱秀

简介

IgG抗体( immunoglobulin G)在免疫应答中起着激活补体，中和多种毒素的作用。IgG抗体持续时间长，是唯一能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。它们还从乳腺分泌进入初乳，使新生儿第一时间得到抗体保护。IgG是四链单体，占血清Ig总量的75%，是血清和细胞外液中最主要的抗体成分，可将人IgG分为四个亚类，依其在血清中浓度高低，分别为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG自出生后三个月开始合成，三到五岁接近成人水平。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产生，血清半衰期较长，约20~23天，是再次体液免疫应答产生的主要抗体，其亲和力高，在体内广泛分布，具有重要的免疫效应，是机体抗感染的主力军，故临床使用丙种球蛋白进行免疫治疗时，应以每2～3周注射一次为宜。

IgG1、IgG3、IgG4可穿过胎盘屏障，在新生儿抗感染免疫中起重要作用；IgG1、IgG2、IgG4可通过其Fc段与葡萄球菌蛋白A（SPA）结合，借此可纯化抗体，或用于免疫诊断；IgG1、IgG3可高效激活补体，并可与巨噬细胞、NK细胞表面Fc受体结合，发挥调理作用、ADCC作用等；某些自身抗体和引起二、三型超敏反应的抗体也属于IgG。

功能

1.激活补体经典途径，介导溶菌和细胞毒作用；

2.介导ADCC效应；

3.调理吞噬作用；

4.结合SPA；

5.中和毒素和病毒。

在抗感染免疫尤其是再次免疫应答中发挥重要作用。IgG类自身抗体参与Ⅱ、Ⅲ型超敏反应。

抗体技术

粗提法提取球蛋白

大多用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。硫酸铵盐析须经过多次沉淀，第一次用40%饱和度，第二次用35%饱和度，第三次用33%饱和度，经三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸钠法更简便，用20%即可将γ球蛋白沉淀出来。经盐析后的γ球蛋白虽大多属于IgG，但还有5%其他区带蛋白，如γ区的杂蛋白。又因IgG组分中还含其他所谓正常的IgG，产生干扰。因此盐析法粗提的γ球蛋白只能用于一般的实验，或者是抗体效价较高的抗血清。

离子交换层析法提取IgG

常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素，以QAE-Sephadex最为理想，DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5～8.6的磷酸盐缓冲液中平衡，将水分抽干，称湿重Ig加于10ml血清中，在室温30min后，离心或过滤除去离子交换剂。上清液再如此处理一次，即获得较纯的IgG，甚至不含其他杂蛋白。用该技术纯化IgG简便，不损坏抗体，既可小量提取，也可大量制备。

亲和层析法提取特异性IgG

将纯化抗原或粗制抗原（如是单价特异性则对抗原要求不高）交联Sepharose4B制成亲和层析柱，将抗血清过柱后洗去未结合的杂蛋白，再用硫氰酸钾洗脱，流出的是纯的特异性IgG抗体。因硫氰酸钾对抗体有破坏作用，应及时透析除去。纯化的IgG因含量低，失去保护作用，应及时应用或冻干保存，亦可20℃保存，但皆不理想；加入三乙醇胺或甘油可起保护作用。

酶解法制备F2片段

胃蛋白酶对IgG的作用点是在连接两重链的二硫键靠C端处（232氨基酸处），结果两个Fab由二硫键连接，保留了抗体的结合点。与IgG相比，F（ab'）2的特点是去掉了Fc段，这样在细胞免疫实验中免除了受体作用；同时也使IgG失去主要的抗原特性，不被抗IgG抗体结合；在反向间接血凝中，用F（ab'）2致敏羊红细胞比用IgG效果好。