骨髓配型

骨髓配型简称BMT。是指选择与受者组织相容性配合的供体。实质是造血干细胞移植。骨髓配型是治疗各种血液肿瘤、再生不良性贫血症、重度地中海型贫血症以及一些先天性免疫缺乏症或代谢性疾病的根本治疗方法。骨髓配型主要用于造血干细胞移植，配型原则首先选择直系兄弟姊妹，因为直系兄弟姊妹HLA配型全相合几率是25%。如果从直系兄弟姊妹间能找见完全相合的HLA配型，则可以献干细胞，做干细胞移植。如果直系兄弟姊妹间没有完全相合的配型，可以到中华骨髓库找完全相合的供体。若中华骨髓库里仍然没有完全相合的配型，可以选择父母或者子女，称为单倍体移植，也叫半相合造血干细胞移植。随着造血干细胞移植技术进步，此技术在全国广泛开展，即父母给子女或子女给父母捐献干细胞。如果堂兄妹、表姐妹、表兄弟是单倍体，也可捐献造血干细胞。

配型原因

根据干细胞的来源不同可分为自体、同基因（syngeneic）和异基因（allogeneic）BMT。同基因骨髓移植是指同卵孪生同胞间的移植，由于供、受者在遗传学上相同，故与自体骨髓移植一样，不存在免疫不相容的问题。异基因的骨髓移植（allo-BMT）的供髓细胞在遗传上与受者细胞起源不同，与肾、肝、心等器官移植相比，allo-BMT更易发生排斥反应，而一旦供髓植活后又可发生移植物抗宿主病（GVHD），故供、受者间要进行严格的组织配型，受者在移植前必须用免疫抑制剂预处理。

什么是配型

选择与受者组织相容性配合的供体。

在选择适合的供体时，首先从在兄弟姐妹中选择供髓者；如不成，则在近亲及血缘无关的自愿者中寻找供髓者。在供者选择上首先在同胞中用血清学方法做HLA检查，所得结果相差不大后再做淋巴细胞培养（MLC）来检测D位点并核实HLA配型。即使血清学或分子生物学方法所不能检出的组织相容抗原的差别往往可通过MLC测出。目前已采用分子遗传学技术直接检测HLA基因，如多聚酶链反应（PCR）技术，序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPA)及限制性片断长度多态性（RFLP）技术，可作为BMT组织配型的重要补充，尤其适用于无关供者组织配型的核实。

HLA配型的重要性及骨髓移植的过程

在HLA配型方面，主要进行HLA-A、HLA-B和HLA--DR三对位点的配型，只有两个个体的HLA配型完全相同才能进行造血干细胞移植，否则可能会发生两种情况，一是病人体内的免疫细胞把植入的供体细胞当作"异物"或"入侵者"进行攻击，称为"移植排斥反应"，其结果是移植失败，"造血"不能在病人体内植活。另一种可能是供体的造血细胞在病人体内植活，产生大量的免疫活性细胞，这些细胞"反客为主"把病人的组织和细胞当作"异物"和"入侵者"进行攻击，最容易受攻击的组织和器官是皮肤、肝脏和肠道，发生皮疹、黄疸、转氨酶升高和腹泻不止甚至血便，称为移植物抗宿主病（GVHD），严重者可致命。

由于HLA-AB的多样性最明显，一般对志愿者先做HLA-AB的分型，待检索供、受者HLA-AB相配后，再对供者作HLA-DR分型检测，如果供、受者的HLA完全相配，同时供者健康检查合格，就可以着手准备移植手术。用化学药物和放射治疗摧毁患者身上的病变造血细胞后再接受移植。植入方法如同输血，植入的造血干细胞在人体繁植，重建造血和免疫系统，病人逐渐恢复健康。骨髓移植对白血病的有效治愈率可达到65-75%。

HLA配型技术

HLA血清学方法

这种方法出现的比较早，技术比较成熟，主要应用于HLA Ⅰ类抗原（HLA-A、HLA-B）的分型，适用于骨髓移植前大量骨髓捐献者的HLA-AB检索工作。而在HLA-DR类分型中因高质量的定型血清来源困难，存在交叉反应，对抗原特异性确定有出入，而血清学表型的判定还受分离B淋巴细胞的纯度与活力、补体质量等因素的影响，因此导致比较高的分型错误率。

HLA复合体微卫星分析技术

在真核细胞中，某些DNA组分在碱基成分上与主要的DNA组分明显不同，且在CsSI梯度离心时能分离为明显的区带，其中含有2～3个碱基的成为微卫星（microsatellite）。在真核细胞常染色体中，微卫星可以不同的间隔和频率重复出现，从而表现为高度多态性。在HLA基因复合体中或其临近区域，这种微卫星重复序列已绘制成图。因此，可应用序列特异性引物，通过PCR扩增，根据产物的长度确定微卫星的多态性。微卫星分析技术能够迅速准确的识别供、受者间HLA单倍型的异同，且由于它包括HLA复合体的更宽区域，可能比HLA-Ⅰ或Ⅱ类单个座位等位基因的分析更为有效，从而为器官移植（尤其是骨髓移植）时供体的选择提供了重要的参数。

MHC区段配型技术

区段配型（block matching）的理论依据为：在MHC复合体长期进化的过程中，由于各MHC基因的内含子并不编码功能蛋白，其所接受的选择压力不大，故相对外显子而言较为稳定，可延续许多世代而不发生改变。研究资料已证实，在一组等位基因中，可能共享某一段内含子序列。从进化和遗传的角度看，这样的一组等位基因是由同一个祖先谱系进化而来，共同享有的内含子序列即为该谱系的特异性标记。因此，不同的MHC等位基因可据此归于不同的谱系，且不同谱系间MHC基因序列的差异明显大于同一谱系内MHC基因序列的差异。对随机人群应用block matching进行移植配型，其目的是寻找与受者属于同一HLA谱系的供者，以避免移植后出现较强的排斥反应。该技术最大的优点并非在于单个HLA基因的相配，而是着眼于整个HLA单体型基因序列最大程度的相似，其实践应用价值已经在HLA多态性的家系调查和BMT疗效的回顾性分析中得到初步证实。