蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶,因此可以用苯甲基磺酰氟抑制其作用,苯甲基磺酰氟是一种丝氨酸蛋白酶的抑制剂。在纯化蛋白质时用于防止蛋白质的降解。
值得注意的是,蛋白酶K在 原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
蛋白酶K已广泛应用在 皮革、 毛皮、 丝绸、 医药、 食品、 酿造等方面。皮革工业的 脱毛和 软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。蛋白酶还可用于 蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。临床上可作药用,如用胃蛋白酶治疗消化不良,用酸性蛋白酶治疗支气管炎,用弹性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、 胰凝乳蛋白酶对外科化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的治疗。加酶洗衣粉是 洗涤剂中的新产品,含碱性蛋白酶,能去除衣物上的 血渍和蛋白污物,但使用时注意不要接触皮肤,以免损伤皮肤表面的蛋白质,引起皮疹、湿疹等过敏现象。
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