血源筛查

血源筛查的定义：由于通过血液可以传播乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病和梅毒等多种严重的传染病。为了保障临床用血的安全，血液制品的质量，防止供受血之间的交叉感染和采血及血液制品工作者的健康，必须防止上述疾病的感染者进入供血队伍，防止上述疾病病原体阳性血浆直接输注病人或用于血液制品生产。为此必须用当前质量最好、最可靠的诊断试剂筛查供血员及其血样。

简介

血源筛查的不少于10000例样本数。

血源筛查范围，是指HBsAg-ELISA，抗-HCV-ELISA，抗-HIV-ELISA，梅毒检测试剂（ELISA，TRUST等）。

血源筛查详细解：

在严重出血时或者患有严重贫血、白血病、骨髓纤维化等疾病时，人们不得不接受输血。但在输血的同时也承担着被感染其他疾病的危险。引致输血传播性疾病中，HBV、HCV、HIV是对输血安全性构成严重威胁的主要病毒，HBV在我国人群中感染率高达10.3%，因此，严重威胁我国的输血安全。 HCV在我国人群中感染率为1.0%～3.1%，由于技术原因，对供血者还存在一定的漏检率，致使70%输血传播性肝炎是由HCV引起。HIV的传播途径之一是经血传播，输入了带HIV的血液感染HIV的可能性估计超过90%（相反，一次性交的风险为百分之几到小于1%），一次输血带入HIV病毒量是非常大的，通过这种方式感染后，很快就会发展为AIDS，平均时间是3－5年（儿童约为2年），全球HIV感染者中，约5%～10%为经血感染，我国也应重视HIV对输血安全的威胁。因此如何有效地控制和预防上述三种病毒性疾病在人群中的扩散和传播是关系到人类健康和未来的大事，同时也得到了各国政府和卫生部门的高度重视。由于以上三种病毒都可经携带病毒的血液及血液制品传播，而全球每年因输血及使用污染的血制品罹患以上三种病毒性疾病的事件时有发生。因此，如何筛查血液及血制品中以上三种病毒，以增加输血和血制品安全性的问题是关系到千家万户幸福的大事，也是临床检验医学研究的重大课题之一。总之，严格筛查血源及血制品中HBV，HCV，HIV，是杜绝以上三种病毒经输血及使用污染血制品传播最为关键的一个环节。

近年来随着生物医学和检验技术的进展，输血及血液制品安全性有了很大的改善，但经血源性传播的病毒性疾病残余风险度依然很高。目前，在临床上筛选各种血源性传播疾病的方法，主要是免疫学诊断方法。尽管随着第三代单克隆诊断抗体的出现，在很大程度上增加了筛查和检测的灵敏度，并在一定程度上减少了血源传播病毒性疾病的概率。但由于受免疫学诊断方法的灵敏度及与生俱来的限制，依然不能完全杜绝阳性病毒血样的漏检，漏检率较高。其主要原因在于：免疫学诊断主要依赖抗原抗体介导的免疫反应，而病毒感染机体后，机体产生可检测水平的高滴度抗体的需要一段相对较长的时间。另外，由于个体免疫机能不同，其中有少数感染者感染后机体所产生的抗体滴度有可能低于免疫学检测线一下，甚至不产生抗体。因此，免疫学诊断方法不能检测出处于窗口期和新近感染病毒的献血员，这样势必导致漏检。其次，抗原出现变异以及稀有亚型也可导致漏检，因此，免疫学筛查后，输血相关疾病传播依然存在一定的概率。

特点

目前免疫学检测以上三种病毒的平均窗口期分别为：HBV：56天，HCV：70天，HIV：22天。近5年来，随着以核酸检测（Nucleic acid test，NAT）为代表的分子生物学技术在血液筛查方面的应用，输血及血制品安全性有了很大的提高。在理论上， NAT技术能够显著的缩短病原体检出的窗口期。另外，NAT技术灵敏度和特异性均较显著的高于免疫学方法。核酸检测HBV，HCV，HIV病毒的窗口期较抗体检测分别提前：9天、25天、14天。而应用NAT技术筛查献血员，相应的可将献血员传播以上病毒性疾病的概率分别降低42%、72%和50%。德国红十字血液中心，利用NAT技术检测免疫学诊断完全正常的献血员，检出以上三种病毒的阳性的率分别为：HBV 6/650403，HCV 69/650403，HIV 0/650403。同样，日本也利用NAT技术检测了免疫学检测完全正常的血样，得出的结论是：三种病毒总的阳性率为1/76000。其中以HCV与HBV占大多数，HIV也占相应的比例。总之，随着NAT技术在临床检验中应用的日趋完善和成熟，NAT技术的灵敏度和特异性已经能够满足血液筛查的目的，应用该技术进行血液筛查能够显著的缩短病原体检出的窗口期。因此，现阶段在世界范围内开展大规模血液筛查多采用NAT技术。其中应用最多最常见的两种NAT技术是PCR-ELISA和荧光-PCR（TaqMan技术）。

由于HBV,HCV,HIV这三种病毒可经血源传播的特点以及其对人类的健康的危害性突出的原因，目前在世界范围内进行大规模血液及血制品筛查多检测此三种病毒。为提高工作效率，节省经费，开展血液筛查多采取多份血样混合后组成Pool的方案。应用NAT技术筛查的大体的技术路线为：先筛测一个Pool中是否含病毒，如NAT检测显示病毒核酸为阳性，则可拆分该Pool，也就是将组成该Pool的原始样品，组合成次级Pool，再行NAT检测，直到确定原始的阳性样品为止。

目前，在世界范围内有关进行血液筛查的试剂和方案如组成一个Pool的原始样品数以及检测试剂的灵敏度等方面还缺乏统一的标准。通常会综合考虑费用以及检测时间等因素，有24份/Pool，50份/Pool，96份/Pool等，其中最常见的为24份/Pool。如美国Roche公司开发的应用PCR-ELISA技术进行血液筛查试剂盒的方案中，一个Pool就由24份样品组成。Roche公司采用PCR-ELISA(24份/Pool，取样量50μl/份)法的灵敏度：HBV:25Copies/ml；HCV:50IU/ml；HIV:25Copies/ml。日本人采用荧光-PCR（TaqMan技术）同时检测三种病之Pool方案的灵敏度(24份/Pool,取样量200μl/份)分别为：HBV:22-60 Copies/ml,HCV:61-112 IU/ml,HIV:33-66 IU/ml。