过氧化氢酶活性测定

过氧化氢酶活性测定（Determination of catalaseactivity），是根据过氧化氢酶（PHD）能催化过氧化氢生成氧的特性，常用碘量法和电极法。

过氧化氢酶介绍

过氧化氢酶（catalase，CAT）普遍存在于植物组织中，是重要的保护酶之一，其作用是清除代谢中产生的H2O2，以避免H2O2积累对细胞的氧化破坏作用，因而其活性的高低与植物的抗逆性有关。

测定方法

紫外吸收法

H2O2对240nm波长的紫外光具有强吸收作用，CAT能催化H2O2分解成H2O和O2，因此在反应体系中加入CAT时会使反应液的吸光度（A240）随反应时间降低，根据A240的变化速率可计算出CAT的活性。

改良

比色测定法

过氧化氢酶(Catalase,CAT)广泛存在于各种生物体内.在测定CAT 活性的众多方法中,以紫外吸收测定法最为简便,但样品中应无在240nm 处有强吸收峰的杂质.Sinha 建立的测定方法可靠,不受样品中蛋白等物质的干扰,但操作和计算均较繁琐,不适合大批样品的测定。故使用比色测定法。

碘滴定法

CAT能催化H2O2分解成H2O和O2，其活性大小以一定时间内分解H2O2的量来表示。当反应体系中有过量H2O2存在时，酶与底物（H2O2）反应结束后，用碘量滴定法测定剩余的H2O2。其测定原理是：在钼酸铵催化下，H2O2与KI反应，放出游离I2，然后用Na2S2O3滴定碘。根据空白和测定二者滴定差值，即可计算出酶催化分解H2O2的量